کیت استخراج یا تصفیه اسید نوکلئیک
Nاوکلئیک Acid Eاستخراج Or تطهیر Kitیا در دمای -20 درجه سانتیگراد ذخیره می شود. نمونه باید با استفاده از پیچش 0℃ حمل شود.
Introduction
کیت استخراج یا تصفیه اسید نوکلئیک (روش دانه های مغناطیسی) برای خالص سازی خودکار RNA و DNA از مایعات بدن (مانند سواب، پلاسما، سرم) با استفاده از ابزارهای استخراج خودکار اسید نوکلئیک طراحی شده است. فناوری ذرات مغناطیسی DNA/RNA با کیفیتی را فراهم می کند که برای استفاده مستقیم در کاربردهای پایین دستی مانند تقویت یا سایر واکنش های آنزیمی مناسب است.
Application Range
خون کامل، پلاسما، سرم و سایر نمونههای بافت به طور مستقیم لیز و هضم شدند. اسید نوکلئیک آزاد شده به طور انتخابی توسط دانه های مغناطیسی نانومتری فوق پارامغناطیسی جذب شد. سپس پروتئین، یونهای نمک معدنی و ناخالصیهای آلی با محلول شستشو حذف شدند. در نهایت اسید نوکلئیک با شوینده شستشو داده شد تا محلول اسید نوکلئیک خالص به دست آید.
Kit Contents
گربه خیر | YXN-VIRAL01-32A-BR | اجزاء | ||
-50A | - 100A | |||
اندازه | 32 تس | 50 تست | 100 تست | |
لیز بافر | 96 چاه پیش بسته ed بشقاب ها 2 عدد | 25 میلی لیتر | 50 میلی لیتر | سورفکتانت و تریس |
بافر شستشو I | ★ 15 میلی لیتر | ★ 30 میلی لیتر | محلول پر نمک | |
شستشو بافر Il | ★ 6 میلی لیتر * 2 | ★ 12 میلی لیتر * 2 | محلول کم نمک | |
بافر شستشو | 10 میلی لیتر | 20 میلی لیتر | محلول کم نمک | |
معرف MagaBio | 1.0 میلی لیتر | 2.0 میلی لیتر | ذرات مغناطیسی | |
کتابچه راهنمای (=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Nنکات:برایYXN-VIRAL01-32A-BR-50A،قبل از استفاده، 15 میلی لیتر اتانول مطلق را به ★ 15 میلی لیتر Wash Buffer I اضافه کنید. قبل از استفاده، 24 میلی لیتر اتانول مطلق را به 6 میلی لیتر بافر شستشو Il اضافه کنید. | ||||
برایYXN-VIRAL01-32A-BR-100Aقبل از استفاده، 30 میلی لیتر اتانول مطلق را به ★30 میلی لیتر Wash Buffer I اضافه کنید. قبل از استفاده، 48 میلی لیتر اتانول مطلق را به ★ 12 میلی لیتر بافر شستشو Il اضافه کنید. |
Stنارنجی Conditions
پس از رسیدن کیت، اجزای کیت را می توان در دمای اتاق (15-25 درجه سانتیگراد) نگهداری کرد. معرف ها تا یک سال از تاریخ تولید پایدار هستند.
Sample Requirements
1. نمونه قابل اجرا: سواب، پلاسما، سرم و خون کامل و غیره.
2. ذخیره سازی و حمل و نقل نمونه: نمونه باید فورا مورد آزمایش قرار گیرد
Materials و Devices Required but Not Provided
1. دستکش یکبار مصرف بدون پودر
2. ظرف خطرناک زیستی
3. مداد یا هر
Proسدوre
در ادامه از لوسیون سواب استخراج نوار نمونه به عنوان مثال برای توضیح مختصر مراحل عملکرد معرف استخراج بر روی ابزار استخراج بیولوژیکی اسید نوکلئیک استفاده شده است.Bioer NPA-32PیاSMهنر 32. برای سایر انواع نمونه، لطفاً به دفترچه راهنمای کاربر مراجعه کنید. همچنین میتواند توسط مشتریان بر اساس خرید تجربی اداره شود:
1. معرف آماده سازی
الف برایYXN-VB03-32A-50A و YXN-VB03-32A-100A
500uL بافر Lysis را به ستون 1 و 7 از صفحه 2.2mL 96 چاه عمیق، 500uL Wash Buffer I به ستون 2 و 8، 500uL Wash Buffer II به ستون 3، 4 و 9،10 اضافه کنید. 70uL بافر شستشو به ستون 5 و 11، 180uL آب خالص و 20uL معرف MagaBio به ستون 6 و 12 (قبل از استفاده، دانه های مغناطیسی باید کاملا مخلوط شوند)
ب برایYXN-VB03-32A
96 معرف از قبل بسته بندی شده را در دمای اتاق قرار دهید. بشقاب 96 چاهی را سه بار وارونه تکان دهید و کیسه پلاستیکی را جدا کنید. معرف از پیش بسته بندی شده را برای چند ثانیه سانتریفیوژ کنید (یا چند بار با دست بچرخانید) تا معرف به دیواره لوله ها نچسبد. فیلم فویل آلومینیومی صفحه 96 چاهی را جدا کنید و جهت صفحه را مشخص کنید (مهره های مغناطیسی در ستون 6 و 12)،
2.نمونه استخراج
1. نمونه 300uL را به ستون های 96 صفحه چاهی #1 و #7 اضافه کنید، لطفا از آلودگی متقاطع خودداری کنید.
2. صفحه چاه عمیق 96 را روی ساز قرار دهید، نوک های 8 نواری را روی ساز نصب کنید.
3. برنامه را طبق مراحل زیر اجرا کنید
4. پس از اتمام تصفیه خودکار، بافر شستشو در ستون های 5 و 11 را به یک لوله سانتریفیوژ ضد هسته ای تمیز 0.5 میلی لیتری منتقل کنید. اگر بلافاصله از آن استفاده نمی کنید، لطفاً در دمای 20 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.
Performance Characteristics
1. محصول استخراج شده توسط معرف تشخیص DNA HBV با حساسیت بالا شناسایی می شود تا به حساسیت IU/mL 10 برسد. محصول استخراج شده توسط معرف تشخیص RNA HCV با حساسیت بالا شناسایی می شود تا به حساسیت IU/ml 50 برسد.
2. 4 نمونه (نمونه سرم/پلاسما، نمونه سواب نازوفارنکس، نمونه سلول لایه برداری شده دهانه رحم) را انتخاب کنید، هر نمونه 10 بار با 3 گرادیان (شامل نمونه اصلی 4 غلظت) رقیق می شود، با استفاده از معرف های واجد شرایط و عوامل آزمایش برای تشخیص داخلی. ژن مرجع مطابق دستورالعمل محصول، و مقدار Ct هر دسته کمتر از 1 متفاوت است.
Step | خوب مکان | Prاوگرام نام | Waiting Time(min:SS) | Mixing Time(mدر:SS) | Magnet Time(min:SS) | Aجذب | Sادرار کردن | Vعلوفه تاتوس (μL) | Tدرجه حرارت |
1 | 1 | Lyخواهر | 0:00 | 2:00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Bمی خواند | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wخاکستر 1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wخاکستر 2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wخاکستر 3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | شستشو | 2:00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | دور انداختن | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. GENERAL ایمنی.
استفاده از این محصول به روشی که در مستندات کاربر مشخص نشده است ممکن است منجر به آسیب شخصی یا آسیب به ابزار یا دستگاه شود. اطمینان حاصل کنید که هر کسی که از این محصول استفاده می کند دستورالعمل های مربوط به اقدامات ایمنی عمومی برای آزمایشگاه ها و اطلاعات ایمنی ارائه شده در این سند را دریافت کرده است.
1.1 قبل از استفاده از ابزار یا وسیله، اطلاعات ایمنی ارائه شده در مستندات کاربر ارائه شده توسط سازنده ابزار یا دستگاه را بخوانید و درک کنید.
1.2 قبل از دست زدن به مواد شیمیایی، تمام برگه های داده های ایمنی (SDS) قابل اجرا را بخوانید و درک کنید و از تجهیزات حفاظت فردی مناسب (دستکش، روپوش، محافظ چشم و غیره) استفاده کنید. برای دریافت SDS ها، به بخش «اسناد و پشتیبانی» در این سند مراجعه کنید.
2. شیمیایی ایمنی
حمل و نقل شیمیایی عمومی. برای به حداقل رساندن خطرات، اطمینان حاصل کنید که پرسنل آزمایشگاه دستورالعملهای ایمنی عمومی برای استفاده از مواد شیمیایی، ذخیرهسازی و ضایعات ارائهشده در زیر را مطالعه و تمرین میکنند، و برای اقدامات احتیاطی و دستورالعملهای خاص با SDS مربوطه مشورت کنید: برگههای اطلاعات ایمنی (SDS) ارائه شده توسط مواد شیمیایی را بخوانید و درک کنید. قبل از اینکه هر گونه مواد شیمیایی یا مواد خطرناک را ذخیره کنید، کار کنید یا با آن کار کنید.
2.1 تماس با مواد شیمیایی را به حداقل برسانید. هنگام کار با مواد شیمیایی از تجهیزات حفاظت فردی مناسب استفاده کنید (به عنوان مثال، عینک ایمنی، دستکش یا لباس محافظ).
2.2 استنشاق مواد شیمیایی را به حداقل برسانید. ظروف مواد شیمیایی را باز نگذارید. فقط با تهویه مناسب (مثلاً هود بخار) استفاده کنید.
2.3 به طور منظم برای نشت یا نشت مواد شیمیایی بررسی کنید. اگر نشت یا نشت رخ داد، مراحل پاکسازی سازنده را همانطور که در SDS توصیه شده است دنبال کنید.
2.4 ضایعات شیمیایی را در هود بخار نگهداری کنید.
2.5 از استفاده از ظروف زباله اولیه و ثانویه اطمینان حاصل کنید. (یک زباله اولیه
ظرف زباله های فوری را نگه می دارد. یک ظرف ثانویه حاوی نشت یا نشت از ظرف اولیه است. هر دو کانتینر باید با مواد زائد سازگار بوده و الزامات فدرال، ایالتی و محلی را برای نگهداری ظروف برآورده کنند.).
2.6 پس از خالی کردن ظرف زباله، آن را با درپوش ارائه شده ببندید.
2.7 ضایعات تولید شده توسط برنامه های کاربردی خاص، معرف ها و بسترهای مورد استفاده در آزمایشگاه را مشخص کنید (در صورت لزوم با تجزیه و تحلیل).
2.8 اطمینان حاصل کنید که زباله ها طبق تمام مقررات محلی، ایالتی/استانی و/یا ملی ذخیره، انتقال، حمل و نقل و دفع می شوند.
2.9 مواد رادیواکتیو یا خطرناک زیستی ممکن است نیاز به جابجایی خاصی داشته باشند و محدودیتهای دفع ممکن است اعمال شود.
3.بیولوژیکی خطر ایمنی
خطر زیستی بالقوه بسته به نمونه های مورد استفاده در این ابزار، سطح ممکن است یک خطر زیستی در نظر گرفته شود. هنگام کار با مخاطرات زیستی از روش های ضد آلودگی مناسب استفاده کنید.
خطر زیستی. نمونههای بیولوژیکی مانند بافتها، مایعات بدن، عوامل عفونی و خون انسانها و سایر حیوانات پتانسیل انتقال بیماریهای عفونی را دارند. تمام مقررات محلی، ایالتی/استانی و/یا ملی قابل اجرا را دنبال کنید. از تجهیزات حفاظتی مناسب استفاده کنید، که شامل اما نه محدود به: عینک محافظ، محافظ صورت، لباس/کت آزمایشگاهی و دستکش است. تمام کارها باید در تأسیسات مجهز و با استفاده از تجهیزات ایمنی مناسب (مثلاً دستگاه های مهار فیزیکی) انجام شود. قبل از کار با مواد بالقوه عفونی، افراد باید مطابق با الزامات قانونی و شرکت/موسسه قابل اجرا آموزش ببینند.
دستورالعمل های قابل اجرا و/یا الزامات قانونی را در موارد زیر بخوانید و دنبال کنید:
در ایالات متحده: دستورالعمل های وزارت بهداشت و خدمات انسانی ایالات متحده منتشر شده در ایمنی زیستی در آزمایشگاه های میکروبیولوژیکی و بیومدیکال در: www.cdc.gov/biosafety یافت می شود.
استانداردهای ایمنی و بهداشت شغلی، پاتوژن های خونی (29 CFR§1910.1030)، یافت شده در:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
پروتکلهای برنامه ایمنی زیستی شرکت/موسسه شما برای کار با مواد بالقوه عفونی. اطلاعات بیشتر در مورد دستورالعمل های خطرات زیستی در: www.cdc.gov موجود است.
در اتحادیه اروپا: دستورالعمل ها و قوانین محلی در مورد خطرات زیستی و احتیاط های ایمنی زیستی را بررسی کنید و به بهترین شیوه های منتشر شده در کتابچه راهنمای ایمنی زیستی آزمایشگاهی سازمان جهانی بهداشت (WHO)، ویرایش سوم، در: www.who.int/csr/resources/publications مراجعه کنید. /biosafety/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/en/.